游離甲狀腺素（FT4） 放免檢測(cè)

甲狀腺素是由甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞合成和分泌的激素。妊shen、哺乳、肝硬化、腎病綜合征等可使血清甲狀腺素結(jié)合球蛋白濃度及其結(jié)合力發(fā)生改變，可使游離甲狀腺素濃度發(fā)生變化。

[試驗(yàn)原理]

人體血液中三石典甲腺原氨酸 T3和甲狀腺素 T4的絕大部分與甲狀腺結(jié)合球蛋白和白蛋白結(jié)合進(jìn)行循環(huán)，但結(jié)合部分的激素沒(méi)有生物活性，真正具有生物活性的只是極小部分游離激素，即占總?cè)?/span>石典甲腺原氨酸 TT30.3%的游離三石典甲腺原氨酸 FT3 和占總甲狀腺素 TT40.03％的游離甲狀腺素 FT4。所以血清中 FT3和 FT4濃度更能反映甲狀腺功能狀態(tài)水平。本品采用了第二抗體＋聚已二醇沉淀法放射免疫分析試驗(yàn)原理：含游離甲狀腺素(FreeThyroxine)的樣品和 125I 標(biāo)記的游離甲狀腺素(FT4)與相應(yīng)的抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。反應(yīng)后加入二抗及 PEG，使免疫復(fù)合物沉淀，離心，測(cè)沉淀放射性計(jì)數(shù)。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到樣本中 FT4的濃度。

[實(shí)驗(yàn)方法]

1、 將實(shí)驗(yàn)所需試劑及樣本放置室溫，平衡至少 30 分鐘以上才可進(jìn)行操作；
2、 取 60X12mm 聚苯乙烯管進(jìn)行編號(hào)，所有實(shí)驗(yàn)均做雙管重復(fù)；
3、 取每個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控血清和樣本 50µl 加入相應(yīng)編號(hào)的試管中；
4、 每管均各加入 100µl 標(biāo)記物工作液；
5、 除 T、NSB 管外，每管均各加入 100µl 抗體工作液，充分混勻；
6、 37℃溫育 1 小時(shí)；
7、 每管均各加入 500µl 分離劑后，充分混勻；
8、 離心 3500 轉(zhuǎn)／分，20 分鐘后，吸去或傾倒掉上清液；
9、 用 γ-計(jì)數(shù)器測(cè)定每管 1 分鐘的放射性強(qiáng)度計(jì)數(shù)；
10、 從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀取樣本及質(zhì)控血清的濃度。

[實(shí)驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意]

1、 γ-計(jì)數(shù)器本底計(jì)數(shù)應(yīng)≤100CPM/分，效率應(yīng)≥75％；
2、 加入放射性標(biāo)記物時(shí)，應(yīng)做好防護(hù)、小心謹(jǐn)慎，以避免造成放射性污染；
100
100
3、 如果某一個(gè)樣本的測(cè)定值高于zui高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品濃度，用零標(biāo)準(zhǔn)品以 1：2 或 1：
4 的比例稀釋樣本后重新測(cè)試，測(cè)試結(jié)果乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

游離甲狀腺素（FT4） 放免檢測(cè)

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