Tris - 氯化銨紅細胞裂解液

一、產(chǎn)品基本信息

產(chǎn)品名稱：Tris - 氯化銨紅細胞裂解液

pH 值：7.2

性狀：無色透明無菌水溶液

用途：用于人、小鼠、大鼠等哺乳動物外周血、脾臟、骨髓及消化后組織單細胞懸液中無核紅細胞選擇性裂解去除，完整保留淋巴細胞、單核細胞、粒細胞等所有有核免疫細胞，去除血紅素對后續(xù)實驗的干擾，廣泛適配流式細胞術(shù)、免疫細胞分離、原代細胞培養(yǎng)、細胞 RNA / 蛋白提取、免疫印跡等分子與細胞生物學(xué)實驗。本品經(jīng) 0.22μm 濾膜無菌過濾，無 DNase、RNase 及熱源污染，對活細胞毒性極低，實驗穩(wěn)定性好。

二、裂解原理

核心有效成分為氯化銨，依托滲透壓裂解機制發(fā)揮作用。NH??無法自由穿透紅細胞膜，氯離子可跨膜擴散，造成紅細胞內(nèi)外滲透壓失衡，水分大量內(nèi)滲使紅細胞膨脹破裂釋放血紅蛋白；有核白細胞細胞膜結(jié)構(gòu)致密，可耐受該離子環(huán)境，從而實現(xiàn)紅細胞高效剔除。Tris 緩沖體系穩(wěn)定體系 pH，避免酸堿波動損傷目標活細胞。

三、操作使用方法

血液或組織消化后的細胞懸液 400g 離心 5 分鐘，棄上清收集細胞沉淀；加入沉淀體積 6–10 倍的裂解液輕柔吹打混勻。小鼠樣本室溫裂解 1–2 分鐘，人外周血裂解 4–5 分鐘，期間顛倒混勻。裂解完畢 4℃、400–500g 離心 5 分鐘，吸棄紅色上清，若裂解不徹底可重復(fù)裂解一輪。隨后用預(yù)冷 PBS 或無血清培養(yǎng)基重懸洗滌 1–2 次，離心收集純凈有核細胞沉淀開展下游實驗。

四、儲存與注意事項

未開封原液 2–8℃避光密封保存，有效期 6 個月；嚴禁凍存，低溫易導(dǎo)致氯化銨析出失效。開蓋后建議分裝使用，防止微生物污染，液體出現(xiàn)渾濁、結(jié)晶、發(fā)黃需直接廢棄。操作全程盡量低溫進行，縮短細胞暴露時間以提升細胞存活率。廢液按實驗室無機鹽廢液規(guī)范處理。

本產(chǎn)品僅限體外科學(xué)研究使用，不得用于人體臨床診斷、動物體內(nèi)注射及藥用場景，規(guī)范操作可最大程度保證細胞活性與實驗數(shù)據(jù)重復(fù)性。

使用方法與注意事項 僅供參考

血細胞樣本低速離心棄上清，加入3–5倍體積裂解液，室溫輕柔裂解4–6 min，待溶液透亮、紅細胞完全裂解后，立即加入PBS緩沖液終止反應(yīng)，離心收集活性白細胞。產(chǎn)品2–8℃避光密封保存，有效期6個月。嚴格把控裂解時間，避免過度裂解損傷靶細胞；溶液出現(xiàn)渾濁、沉淀、變色或污染需直接廢棄；全程無菌操作，保障實驗樣本純凈度與活性。